在化学分析范畴内,荧光检测技术是一种依托光致化学发光现象的检测方法。当激发态分子从激发态回归基态时,会以发光的形式释放能量,这种现象就是荧光。JY-QEY6500-PL荧光量子效率检测系统便是利用这一原理,对能产生荧光的化合物进行检测。
部分原本不发荧光的物质,能够通过化学衍生化的方式转变为荧光衍生物,进而实现荧光检测。该技术具备高灵敏度的突出特点,其最小检测浓度可达到0.1ng/ml,在痕量分析中表现出色。一般来说,JY-QEY6500-PL荧光量子效率检测系统的灵敏度相较于紫外检测器大约高2个数量级。不过,其线性范围相对较窄,这是在实际应用中需要留意的一点。

荧光检测技术在多个领域都起着关键作用。在药物分析领域,它能够对药物中的痕量杂质进行精确检测,保障药物的质量和安全性。在环境监测方面,可用于检测环境中的污染物,像水中的有机污染物、土壤中的重金属等。此外,在生物医学研究中,荧光检测技术也被广泛应用于细胞成像、蛋白质检测等方面,为科研人员提供了有力的工具。
以景颐光电为例,其自主研发的JY-QEY6500-PL荧光量子效率检测系统,是荧光检测技术在材料分析领域的创新性应用。该系统主要用于材料(溶液、粉末、薄膜)荧光量子效率的测量,经过可溯源的光源进行定标,能够进行准确的绝对量子产率、色度测量,同时还可以实现光致发光谱的测量和记录。与传统荧光光谱仪相比,整个系统具有体积小、使用便捷等优点,为相关高校和科研单位提供了一种低成本的荧光探测和量子效率测量解决方案。
高灵敏度:能够检测到极低浓度的荧光物质,适用于痕量分析。选择性好:可对特定的荧光化合物进行检测,减少干扰。非破坏性:不会对样品造成破坏,可进行多次检测。
流动相选择:不能使用抑制或吸收荧光的溶剂作为流动相,以免影响检测结果。环境因素:溶剂的极性和溶液的温度对荧光强度有显著影响。增大溶剂的极性,会使荧光增强;而通常情况下,荧光物质溶液的荧光效率和荧光强度会随着温度的升高而降低。因此,在液相色谱中,JY-QEY6500-PL荧光量子效率检测系统通常在室温下操作,以保证足够的灵敏度。样品浓度:当样品浓度过高时,荧光物质分子易与溶剂分子或其他溶质分子相互作用,引起溶液的荧光强度降低,即荧光淬灭效应。所以,在进行荧光检测时,试样应配成低于10⁻⁶g/mL浓度的溶液,并使用不含荧光物质的溶剂。流通池维护:JY-QEY6500-PL荧光量子效率检测系统的流通池由纯石英制成,其最高耐受背压为20bar。在日常维护中,应确保废液管无挤压、弯折情况,废液管应在废液瓶液面以上,避免堵塞,以防背压过高损毁流通池。激发光源维护:JY-QEY6500-PL荧光量子效率检测系统使用的激发光源通常为氙灯,其可用波长范围为200nm至900nm。为延长灯的使用寿命,可选择"仅在运行时打开"的方式。使用时,氙灯无需预热,可即开即用。氙灯的使用寿命取决于对灵敏度的要求,一般在4000小时左右。随着灯的老化,系统噪音将会增大。当灯无法点亮或噪音超出可接受范围时,就需要更换氙灯。
切断电源,拆卸掉标记的5个螺丝,卸下光源外盖。戴上安全眼镜,取下连接灯罩与主机的插口,拧松灯罩固定螺丝。抓住灯罩拉手,将拉手侧轻轻往上提起来,并从主机中将灯罩拉出来。需注意,关掉电源后,若之前灯是开启状态,一定要等5分钟再去拆卸螺丝,以免烫伤;同时,不要用暴力拉灯罩,灯罩下有滚轮,稍微用力即可拉出。装入氙灯,每个氙灯上下会有"+"或"-"标识,分别代表阳极和阴极。先将灯上下两个螺母取下,然后按照灯罩阴极连接灯阴极、灯罩阳极连接灯阳极的顺序进行连接,并保证灯突起部分对着仪器前面板。灯安装好后,再将灯罩装进本体。灯罩装回本体,顺着滑轨,在提起灯罩的状态下,插进仪器内部后,向下压进去。若设置正确,灯罩不会晃动;然后用固定螺钉固定灯罩,将接头接在仪器上。装好灯罩后,关闭光源盖板,接通电源(确认灯泡的亮灯状况)。操作时,一定要佩戴无粉手套,防止在灯上留下污迹;且注意不要正负极接反,否则容易造成不可控的损失;接通电源后,会有机械转动的卡卡声,这属于正常现象,无需慌张;一定要盖上所有盖板后,再开启电源。
打开维护软件中荧光检测选项卡,将激发光波长(Ex)设定为550nm,发射波长(Em)设定为350nm,取出流通池,边观察光像边进行调整。在试样室的激发光出口侧放张纸(激发光出口中央),并观察激发光束的状态。按照VERTICAL、HORIZONTAL、FOCUS的顺序一点点地反复转动,调整至激光光束(彩虹色)变成最亮为止,完成光源位置的粗调。
粗调完成后,将激发光波长(Ex)设定为350nm,边看数据边进行微调。具体操作如下:完成粗调后,安装流通池。在维修软件中打开荧光检测选项卡,激发波长(Ex)设定为350nm,发射波长(Ex)设定为350nm,在此状态下,边看画面的能量值(Ex),以FOCUS、HORIZON、VERTICAL的顺序一点点地反复转动,直到显示值变成最大为止。显示值成为最大值时即可结束灯位置的调整,要求调整后能量数值在15000以上。
荧光检测技术凭借其独特的优势,在众多领域得到了广泛的应用。而对JY-QEY6500-PL荧光量子效率检测系统的正确使用和维护,以及氙灯的准确安装与调整,对于保证检测结果的准确性和可靠性至关重要。随着技术的不断进步,相信荧光检测技术将会在更多领域发挥更大的作用。
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